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IncRNA和circRNA 的研究套路

IncRNA和circRNA 的研究套路

作者: 7523_68db | 来源:发表于2020-04-23 11:10 被阅读0次

    IncRNA:长链非编码RNA,是长度大于200个核苷酸的非编码RNA。近年来的研究表明IncRNA能在表观遗传、转录及转录后水平上调控基因表达,参与X染色体沉默、基因组印记以及染色质修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等多种重要的调控过程,与人类疾病的发生、发展和防治都有着密切联系。

    研究流程:
    1.先证明这个RNA是非编码RNA (自己筛需要,难度很高,可以找现成的套新的表型和机制)
    查IncRNA的序列:NONCODE数据库
    看其有没有超过100个碱基序列的ORF
    若是circRNA还需证明是环状的

    其他的和miRNA的研究套路完全相同
    2.表达差异
    qPCR
    3.制备基因操作工具
    细胞核定位的用基因编辑技术:基因敲除
    细胞质定位用RNAi技术,因为siRNA 主要是在细胞质发生作用
    4.细胞表型实验
    模法标套路
    5.动物表型实验
    6.rescue验证
    在同一个细胞里先做过表达看表型然后做沉默看表型

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