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Racon三代数据纠错2021-01-19

Racon三代数据纠错2021-01-19

作者: candel | 来源:发表于2021-01-22 08:59 被阅读0次

    使用minimap2将三代数据比对到基因组,再使用racon纠错。做3次。

    一、软件安装

    minimap2安装:直接github上下载make安装。
    https://github.com/lh3/minimap2

    racon使用conda install -c bioconda racon racon 安装。
    也可以直接安装。

    二、将fasta比对到基因组

    先建立索引,在比对。
    x :非常中要的一个选项,软件预测的一些值,针对不同的数据选择不同的值
    map-pb/map-ont: pb或者ont数据与参考序列比对;
    ava-pb/ava-ont: 寻找pd数据或者ont数据之间的overlap关系;
    asm5/asm10/asm20: 拼接结果与参考序列进行比对,适合~0.1/1/5% 序列分歧度;
    splice: 长reads的切割比对
    sr: 短reads比对
    -d :创建索引文件名
    -a :指定输出格式为sa格式,默认为PAF
    -Q :sam文件中不输出碱基质量
    -R :reads Group信息,与bwa比对中的-R一致
    -t:线程数,默认为3

    minimap2 -d ref1.mmi ../assemble/prefix.ctg.fa       # indexing
    minimap2 -ax map-pb   -t 8  ref1.mmi ../data/pb.fasta.gz > map1.sam      # aligment
    

    三、使用racon纠错

    racon -t 8 ../data/pb.fasta.gz map1.sam prefix.ctg.fa > prefix1.fa
    

    polish做三次

    #fist polish
    minimap2 -d ref1.mmi ../assemble/prefix.ctg.fa
    minimap2 -ax map-pb -t 8  ref1.mmi ../data/pb.fasta.gz > map1.sam
    racon -t 8 ../data/pb.fasta.gz map1.sam ../assemble/prefix.ctg.fa > prefix1.fa
    # second polish
    minimap2 -d ref2.mmi prefix1.fa
    minimap2 -ax map-pb -t 8  ref2.mmi ../data/pb.fasta.gz > map2.sam
    racon -t 8 ../data/pb.fasta.gz map2.sam  prefix1.fa  > prefix2.fa
    # third polish
    minimap2 -d ref3.mmi prefix2.fa
    minimap2 -ax map-pb -t 8  ref3.mmi ../data/pb.fasta.gz > map3.sam
    racon -t 8 ../data/pb.fasta.gz map3.sam  prefix2.fa  > prefix3.fa
    

    参考
    https://github.com/lh3/minimap2
    https://zhuanlan.zhihu.com/p/92701077?from_voters_page=true
    https://blog.csdn.net/u012110870/article/details/82500726

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