你会用到的网站：
IGV 官网http://software.broadinstitute.org/software/igv/download～ Broadinstitute出品
Java version8 下载： https://www.java.com/en/download/mac_download.jsp
IGV内置的物种基因组及基因组来源：http://software.broadinstitute.org/software/igv/Genomes
完整的官方帮助文档：http://software.broadinstitute.org/software/igv/book/export/html/6
写在前面：
之前mac不小心升级了一下java，然后igv就不能用了，要写教程必须降级java
-
首先，看官方说明，需要安装Java -8，9以上版本不支持。我的mac不知道什么时候更新到了java 10，按说可以向下兼容，但是事与愿违，igv不能正常使用了。
-
需要降级Java，mac用户可以直接参考，windows可以试下直接下载安装IGV：
-
先删除原来的java
-
terminal打开终端，复制粘贴一下三条命令：
-
sudo rm -fr /Library/Internet\ Plug-Ins/JavaAppletPlugin.plugin
sudo rm -fr /Library/PreferencesPanes/JavaControlPanel.prefPane
sudo rm -fr ~/Library/Application\ Support/Java
-
⚠️：不要通过/usr/bin 删除 Java 工具来卸载 Java。此目录是系统软件的一部分，下次对操作系统执行更新时，Apple 会重置所有更改。
-
finder中进入/Library/Java/JavaVirtualMachines，然后删除之前的jdk.版本号 -
下载安装新的Java version8
-
【Windows用户下载，解压后，点击igv.bat文件即可启动；如果启动失败，用记事本打开并编辑igv.bat文件，在文件的最后新起一行输入pause，保存后，再尝试打开，就可以在Windows下的命令行界面（cmd命令提示符）看到错误信息，再根据信息提示去解决问题；不过一般问题不大】
IGV安装
正文开始：
好啦，问题解决啦，开始正式IGV介绍！
什么是IGV
它是一款本地的探索基因组数据的可视化浏览器，有多个系统版本，支持多种不同类型的输入格式，包括芯片测序、二代测序、基因组注释文件等。推荐使用BAM与SAM格式，主要格式见下表
| 数据来源 | 文件格式 |
|---|---|
| 序列比对 | SAM/BAM |
| 显示覆盖率 | TDF |
| 拷贝数 | SNP、CN |
| 基因表达 | GCT、RES |
| 基因注释 | GFF3/GTF、BED |
| 突变数据 | MUT |
| 追踪参考基因组覆盖度、测序深度（UCSC） | WIG、BW |
一睹IGV
每次打开会自动加载hg19.fa文件，也就是人类基因组，一会进入主界面
主界面
自己构建基因组信息
这里我会举一个昆虫中一种——棉铃虫，这个基因组是17年2月更新在NCBI伤的，属于小众物种，IGV并没有收录。正好拿来练手，当然如果你研究的领域也有基因组被测出来，也可以试一试【注意：在提交基因组文件到IGV之前，要先构建索引】
这些工作都可以在本地进行，只需要打开你本地的git_bash或者putty/xshell或者terminal，解压缩基因组文件=》下载samtools（推荐用conda管理）=>构建索引samtools faidx genome.fasta=>IGV中 输入fasta文件路径=》提供注释文件（可以是组装基因组预测的基因注释文件，也可以是拼接转录组用的gtf文件）=〉其他选项可以忽略=》点击OK推弹出一个框让你输入存储路径
自定义基因组
查看注释文件
这里以人类基因组注释文件为例，下载gtf到电脑
下载完不要急着导入，需要先构建索引
导入注释文件
然后会生成gff3.idx或者gtf.idx文件，说明构建了索引，接着导入File -> Load from file，选择sorted的注释文件
查找基因
查看bam文件
我这里准备的bam文件大小是2.8G，是由人类转录组测序数据得到的，准备的参考基因组是hg19，注释文件是gencode.v28lift37.annotation.sorted.gff3
-
bam文件在导入前，要先使用samtools进行sort和index，
samtools sort test.bam test.sort``samtools index test.sort.bam,生成一个后缀为“.fai”的文件，它根据文件名自动和.bam关联， 另外这两个文件要在一个文件夹下，最后将bam导入IGV中 -
载入bam后，默认会出现两个track（翻译的话，可以理解为不同的轨道，显示不同的信息）Coverage track和Alignment track。
载入bam后
另外基因组信息也可以有collapsed、expanded、squished三种展示形式
基因组信息
-
查看Coverage track
它的意思是显示比对文件的覆盖率和测序深度。横坐标是基因组上的位置，纵坐标是该位置的测序深度。【鼠标放在每一个位点都会显示一个小方框，其中的的内容就是显示总共有多少reads在这个位置，每个碱基各是什么】
点右上角+放大reads可视化窗口后，track会以灰色的条形图来显示每个位点的测序深度。如果某一个核苷酸与参考序列相比，有超过20%的reads是不同的，条形图会显示不同的颜色
Coverage track
显示特定位点变异
关于上图中的右键菜单，解释如下
| 功能 | 含义 |
|---|---|
| Rename Track | 更改track名 |
| Change Track Color | 更改背景色，比如把Coverage Track灰色变紫色 |
| Change Track Height | 改变每一个track的高度 |
| Change Font Size | 改变IGV最左侧字体大小 |
| Set Data Range | 覆盖深度的范围设置 |
| Log scale | 用对数尺度作图 |
| AutoScale | 是否自动缩放 |
- 比较多个基因
比较多个基因
这里看到有许多颜色,这些颜色是根据定义不同比对类型而不同，
不同比对类型颜色也不同
-
查找结构变异
灰色：与参看基因组可以比对的reads
紫色I：插入（鼠标查看插入的碱基信息）
黑色横线：——缺失
欢迎关注我们的公众号～_～
我们是两个农转生信的小硕，打造生信星球，想让它成为一个不拽术语、通俗易懂的生信知识平台。需要帮助或提出意见请后台留言或发送邮件到Bioplanet520@outlook.com
Welcome to our bioinfoplanet!
网友评论