紫外线照射：Pr不照，PBS可照。
准备： 血清（黄色）、胰酶（玫红色）、培养基液（粉色）、废液缸、垃圾可以放一边
先点酒精灯，再开排风
3个滴管：1for废液，1for培养基，1forpbs、胰酶
1.滴管吸出以前的液体
2.加入pbs，垂直加入，不要伸进瓶口。
3.加入胰酶1ml消化3min，待显微镜观察下细胞悬浮变圆。【（滴管加入，不要伸进去）磕一下】
4.10%比例血清加入培养基液，混匀，滴入带血清培养基液终止消化！（3ml）1：1
再用滴管冲洗细胞贴壁，用滴管将 原来的细胞吸出，加入新培养基内。
【可以不离心，打散成细胞悬液，如果不离心，第二天换液。】
5.新培养基盖培养基液3.5ml过底，（不要到瓶口）
无穷大转培养基，铺平。
传2瓶，吸2倍培养基
酒精喷壶消毒！先看下细胞！
培养基液：加血清比例：10%，不容易活加多血清
冻存要离心。800rpm,5min，倒掉上清
单独配冻存液：每瓶共1ml . 90%血清+10%dmso，吸dmso枪头过‘火
先放4度,30min
-20度，30min~1h
-80度，冻很久
慢冻快融
复苏
复苏之后第二天换液，如果贴壁
没贴壁，第三天换液
IK 1640
HB M5A
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