科研汪的日常 46 免疫磁珠法分选细胞

由于课题需要，科研汪学起了新技术——MACS（magnetic-activated cell sorting）磁珠法分选细胞。

基本原理:基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞由于不能与连接着磁珠的特异性单抗结合而没有磁性，不在磁场中停留，从而使细胞得以分离。

常用分选策略有三种：

（1）有柱式分选-阳性分选（磁珠标记的细胞为目的细胞）

（2）有柱式分选-去除分选/阴性分选（磁珠标记的细胞为非目的细胞）

（3）多重分选策略-获得多参数细胞（先“阴性分选”再“阳性分选”）

具体操作流程：（科研汪使用的是阳性分选策略，故以此为例。）

① 磁珠标记：样品与磁珠孵育15min左右；

② 阴性组分先行流出：孵育后的样品过柱处理，标记磁珠的细胞在磁场的作用下吸附到MACS分选柱子上，没有被标记的细胞（阴性组分）先行流到试管中；

③ 洗脱阳性组分：把MACS分选柱子从磁分选器上拿下来，这时磁珠是没有磁力的，故洗脱获得阳性组分，收集后可用于后续实验。