编者：托马斯林 医学博士
生殖干细胞
在哺乳动物中，卵子被认为形成在出生前。在胚胎发育过程中，先驱生殖细胞也称作原始生殖细胞迁徙到生殖腺，随后进入有丝分裂及减数分裂过程而发育为卵子，进而结束了这些生殖细胞的干性潜能。卵子再生理论提出至今已有众多研究报道，在2004年，Johnson等人首次在成年小鼠卵巢中分离得到的生殖干细胞，具有形成新的卵子，且可发育为新的卵泡。随后，在成年小鼠卵巢上皮层处存在少量的有丝分裂活性干性细胞，经体外分离培养可形成卵子样细胞。经统计卵泡闭锁的数目发现，出生后卵子对卵泡池的补充作用是必然存在的。因此，出生后生殖干细胞的存在完全打破了传统卵泡固定理论。
再继Johnson等人的研究报道之后，White、Zou、Tilly、Woods等多位研究者分别采用不同的方法从不同物种卵巢中分离得到了生殖干细胞。然而，在雌性非哺乳动物体内包括果蝇和鱼，存留了生殖干细胞（GSCs）且可在成年体内继续发育形成新的卵子。表明GSCs 是体内唯一能复制且传递遗传信息的干性细胞。
以上研究分离获得的生殖干细胞来自卵巢，并可以分化形成卵子样细胞。自从2006年山中伸弥研究团队的iPS技术获得成功以来，人们能够以另外一种途径获得雌性生殖细胞，并分化形成卵子样细胞。
Medrano等则发现，利用过表达Vasa或Dazl的iPSCs可以分化为原始生殖细胞，并且可以通过减数分裂过程达到成熟。并认为在进化上具有无关性的和相异的RNA结合蛋白可以促进人类来源的生殖细胞在体外的减数分裂。
他们首先通过转基因技术获得能够异常表达Vasa-GFP的iPSCs细胞系和两个hESC细胞系（H9和HSF1），每个细胞系有分为了Vasa-GFP阳性组和阴性组，并通过流式和基因表达确定Vasa-GFP能够异常表达，细胞系构建成功。
随后，这三个细胞系通过诱导生成早期的生殖干细胞，并因为Vasa的异常表达进行减数分裂，表达减数分裂的标志物。
这些细胞培养到14天的时候，检测单倍体细胞，发现单倍体细胞增多，并且能够检测到减数分裂后期的蛋白表达标志物ACROSIN.
随后，Medrano等还构建了过表达DAZL和VASA+DAZL的iPS细胞系和两个hESC细胞系，发现培养到14天时，这些细胞系均能够进行件数分裂，细线期和双线期的细胞数增多，单倍体细胞增多。
该文献主要从VASA和DAZL的过表达对iPSCs诱导生成早期生殖细胞后进行减数分裂的影响，说明VAZA和DAZL确实促进了减数分裂，并生成了单倍体，但生成的单倍体是否真的是卵子样细胞并没有进一步的说明，是iPS细胞诱导生成功能性卵子并产生下一代还需要更进一步的研究。
No.BNC-GW20180022自体干细胞讲堂
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