一:筛选串联重复基因
1.获取NBS的CDS序列
将NBS的基因转录本的ID处理,一条基因只要一个CDS。
EXCEL-->排序-->去重复-->合并1,2列(=A1&"."B1)-->结果
$seqkit grep -f nbs_gene_id Arabidopsis_thaliana.TAIR10.cds.all.fa |seqkit seq -i >cds_hits
2.blast比对
$makeblastdb -in cds_hits -dbtype nucl -title cds_hits
$blastn -num_threads 24 -db cds_hits -query cds_hits -evalue 1e-20 -outfmt 7 >blastn.out
#7格式有表头,6无表头
对结果进行筛选,基于第2及第3列的%identity>75并且aligment length>相比较的两条序列(自己比自己)的75%.
$samtools faidx cds_hits
$perl shaixuan.pl -in1 cds_hits.fai -in2 blastn7.out -out shaixuan.result
但是这里面存在A比B和B比A的重复情况,需要取重复。在EXCEL中在1,2列之后加一列,用函数=IF(A1>B1,A1&B1,B1&A1),表示无论1,2列大小,输出都是大的在前,小的在后。然后全选,以第3列删除重复值,再删除第3列,保存结果为repeat_gene_id。
网友评论