PCR，实验入门基础

PCR: polymerase chain reaction

待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火，再将温度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。这种热变性-复性-延伸的过程就是一个PCR循环。

PCR实验常用Taq酶，但有的实验需要保真度更高的一些酶。高保真的一个通用标准是错配率，错配率越低保真性越好。普通Taq酶的错配率在10-5碱基/循环数，而高保真Taq酶错配率可降到10-6，大大降低了出错的可能性，适合对PCR保真性要求较高的实验，如基因筛选，测序，突变检测等。高保真Taq酶的保真原理是：高保真Taq酶具有3‘-5‘核酸外切酶活性， PCR扩增中如果产生错配碱基，它可以将其切掉，但是也正因为如此，往往扩增效率低一些，而且不宜用TA法克隆。