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Exosomal long noncoding RNA LNMA

Exosomal long noncoding RNA LNMA

作者: 一个没有感情的文献阅读机 | 来源:发表于2020-08-18 17:29 被阅读0次

    本文选自看不懂的杂志,一起看看得了,应该没有什么花样。

    摘要:有临床淋巴结转移的膀胱癌患者预后极差。VEGF-C在BCa淋巴结转移中起重要作用。然而,约20%有淋巴结转移的BCa中VEGF-C表达较低,提示BCa的LN转移与VEGF-C无关。在此,我们证明了BCa细胞分泌的胞外体介导的淋巴管生成促进了BCa的LN转移,这是以VEGF-C无关的方式进行的。我们鉴定了外泌体长非编码RNA(lncRNA),称为淋巴结转移相关的转录子2(LNMAT2),在体外刺激了HLEC管的形成和迁移,并在体内增强了肿瘤的淋巴管生成和淋巴结转移。在机制上,LNMAT2通过与异质核糖核蛋白A2B1(HRNPA2B1)直接相互作用,将LNMAT2负载到BCa细胞分泌的外泌体上。随后,外泌体LNMAT2被HLECs内化,表观遗传学上调prospero同源框1(PROX1)的表达通过hnRNPA2B1募集和增加PROX1启动子中的H3K4三甲基化水平,最终导致淋巴管生成和淋巴结转移。因此,我们的发现突出了外泌体lncRNA介导的LN16转移的VEGF-C独立机制,并确定LNMAT2是BCa LN转移的治疗靶点。

    我大概看完摘要知道作者作了什么了。作者要研究lnMAT2,这个东西哪来的呢?GEO挖来的。然后组织验证一波。发现肿瘤这个lnc更高,与预后相关,并且与淋巴结转移相关,vegf与淋巴结转移无相关性

    文章说的是外泌体,作者又看看外泌体里的这个东西真的样。发现外泌体里比肿瘤的多,敲了肿瘤的lnc,外泌体里也减少了。

    接着就是外泌体与淋巴结转移的关系了。首先是淋巴管生成的情况,体外实验验证外泌体的lnc对淋巴内皮的影响。

    接着看看体内情况。发现瘤内注射外泌体可以促进肿瘤淋巴结转移的发生。研究淋巴结转移都用这个模型吗?不懂

    作者又看看这个外泌体lnc对肿瘤什么影响,为什么要用外泌体教育,直接用过表达的细胞不就行了吗?发现有促进肿瘤的作用。

    玩够了没有,可以做机制了吧。简单干脆,直接做pull down,打质谱,找蛋白,找到了目标蛋白,然后构建肽段观察作用部位。

    然后看看HNRNPA的作用,发现敲减了以后外泌体里面的lnc减少了,所以说这个东西可以促进外泌体lnc转运。以往研究发现miR18a这个不去外泌体中,作者就看了外泌体和细胞比例以此说明外泌体货物增多原因。这个miR198可以被HN转运至外泌体作为阳性对照。体外验证外泌体可以被淋巴内皮细胞摄取。并且发挥促进淋巴内皮增殖的功能。

    原来说的VEGF对淋巴内皮增殖作用显著,作者看了外泌体处理后淋巴内皮vegf的水平个,未见明显改变。有人提出,PROX1通过调节内皮细胞分化和转移扩散,对淋巴管系统的发育至关重要,作者就研究它了,别问作者怎么找到的,就是好文自有天帮。首先作者定位了外泌体在受体细胞的位置,发现在细胞核内多见,玩的还是一样的套路,找lnc的作用位点。当然是启动子区域切几段,然后用双荧光素酶报告实验验证而已。外体LNMAT2可以与淋巴管PROX1启动子序列形成一个三联体,并上调其转录水平。

    hnRNPA2B1通过与靶DNA结合参与H3K4三甲基化(H3K4me3)相关的表观遗传调控。因此,我们研究了hnRNPA2B1是否通过调节HLECs中PROX1启动子区的H3K4me3水平来促进外泌体LNMAT2诱导的PROX1反式激活。染色质免疫沉淀(ChIP)显示,在LNMAT2转染的5637细胞(5637-EXOLNMAT2)和UM-UC-3-EXOLNMAT2分泌的外泌体处理的HLEC中,与hnRNPA2B1和H3K4me3相关的PROX1启动子序列富集。

    既然找到靶点了,那么就该玩弄一下靶点了,发现加入prox1明显促进淋巴管状形成,并且外泌体处理后的肿瘤内及周围组织周围淋巴管增多,prox1染色明显增强。

    按照我们一贯的套路,接下来就是临床相关性验证了。

    文章确实是好文章,读了以后,总体感觉工作量太大,研究方法不算新,可能机制上比较新,总体来说,非常值得学习、借鉴。欢迎大家批评、指正。

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