1. 如果在没有jdk12的conda下安装snpeff,会报错
Error: A JNI error has occurred, please check your installation and try again
Exception in thread "main" java.lang.UnsupportedClassVersionError: org/snpeff/SnpEff has been compiled by a more recent version of the Java Runtime (class file version 55.0), this version of the Java Runtime only recognizes class file versions up to 52.0
at java.lang.ClassLoader.defineClass1(Native Method)
at java.lang.ClassLoader.defineClass(ClassLoader.java:756)
at java.security.SecureClassLoader.defineClass(SecureClassLoader.java:142)
at java.net.URLClassLoader.defineClass(URLClassLoader.java:468)
at java.net.URLClassLoader.access$100(URLClassLoader.java:74)
at java.net.URLClassLoader$1.run(URLClassLoader.java:369)
at java.net.URLClassLoader$1.run(URLClassLoader.java:363)
at java.security.AccessController.doPrivileged(Native Method)
at java.net.URLClassLoader.findClass(URLClassLoader.java:362)
at java.lang.ClassLoader.loadClass(ClassLoader.java:418)
at sun.misc.Launcher$AppClassLoader.loadClass(Launcher.java:352)
at java.lang.ClassLoader.loadClass(ClassLoader.java:351)
at sun.launcher.LauncherHelper.checkAndLoadMain(LauncherHelper.java:495)
解决方法(针对非root用户)
conda create -n java12
conda activate java12
conda install -c r r-rjava
java -version
openjdk version "11.0.9.1-internal" 2020-11-04
OpenJDK Runtime Environment (build 11.0.9.1-internal+0-adhoc..src)
OpenJDK 64-Bit Server VM (build 11.0.9.1-internal+0-adhoc..src, mixed mode)
##足够能带动snpEff就行
conda install -y snpeff ##下载后启动snpEff
参考:https://www.jianshu.com/p/3e3ebd397293
https://zhuanlan.zhihu.com/p/476561285
2.构建自有物种数据库
因为我是要从头构建注释基因集,所以它自带的数据库对我就没有什么用
而第一步便是要找到snpEff.config这个文件进行添加
这个文件在哪呢?
我的是在下面这个这个文件,如果你使用conda安装的,基本就是在minicondas下面pkgs里面的snpeff开头的文件夹里面,然后依次往下找就是了
cd /home/wangshuangyi/miniconda2/pkgs/snpeff-5.1-hdfd78af_2/share/snpeff-5.1-2
#该目录下存在:
scripts snpEff snpEff.config snpEff.jar
假设我要构建的基因组叫Amur_ide
(1) 追加一行文件内容到snpEff.config
echo "Amur_ide.genome: Amur_ide" >> snpEff.config
(2) 在含有snpEff.config那个地方,创建个文件夹data, 然后在data里面又创建两个文件夹Amur_ide,genomes
Amur_ide/ genomes/
Amur_ide/中包括了genes.gff3 cds.fa protein.fa ##无论原名是啥都改为这个
genomes/中包括了基因组文件 Amur_ide.fa ##无论原名是啥都改为这个。
(3) 在含有snpEff.config那个地方,执行命令构建数据库
./snpEff build -gff3 -v Amur_ide
# -c , -config : Specify config file
# -v , -verbose : Verbose mode (详细模式)
(4) 注释
在注释之前,检查vcf变异文件,应去除##注释信息,开头应为:
#CHROM POS ID REF ALT QUAL FILTER INFO FORMAT
java -Xmx4g -jar ../snpEff.jar ann Amur_ide -o vcf -v ./alk_fw_pass_merged_filter.vcf -csvStats 1.csv -stats 1.html > selected.ann.vcf
##-Xmx:堆内存的最⼤值,默认值是物理内存的1/4(且⼩于1G),如默认情况下当堆中可⽤内存⼤于70%时,堆内存会开始减少,⼀直减⼩到-Xms的⼤⼩
# -csvStats <file> : Create CSV summary file.
#-s , -stats, -htmlStats: Create HTML summary file. Default is 'snpEff_summary.html'
#-o <format> : Ouput format [ vcf, gatk, bed, bedAnn ]. Default: VCF.
#-formatEff: Use 'EFF' field compatible with older versions (instead of 'ANN'). (使用与旧版本兼容的'EFF'字段(而不是'ANN')。)
网友评论