亚细胞定位载体的转化----pCGFP-NEO

一、什么是融合表达？

通过基因构建，将两个独立蛋白的编码基因变成一个完整的阅读框，在表达过程中，宿主会将这两个基因当作一个融合基因，从而表达出一个完整的大蛋白。

二、利用GFP融合蛋白法进行蛋白质亚细胞定位

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Prepare：
pC-NEO载体-- 平板划线法培养大肠杆菌细胞 →大提质粒
引物设计（46bp）-- 20bp载体序列+6bp酶切位点+目的基因前20bp序列
提取WT菌株的RNA并反转录成cDNA
限制性内切酶SacⅠ、XbaⅠ双酶切载体

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Sac I酶切序列.png
Xba I酶切序列.png NEO载体图谱.png