克里斯托夫·马洛最伟大的代表作是《浮士德博士的悲剧》，它的故事取材于德国传奇。
浮士德是一位伟大的学者，渴求各方领域的知识。他对中世纪一成不变的学科深感厌烦，开始转向一种黑色魔术。通过咒语他结识了梅菲斯特，也就是魔鬼的仆从。浮士德与魔鬼签立了协议，他将自己的灵魂卖给魔鬼作为回报，魔鬼则要在此后的二十四年里满足浮士德所有求知的愿望。
在魔鬼的帮助下，他尽情施展魔术，与此同时，浮士德还经历了内心的矛盾与斗争，这是通过善天使与恶天使同时出现的情节来表达出来的。在最后一幕，只剩下一段恐惧的独白，生动透彻地揭示了浮士德内心的巨大痛苦。
《浮士德博士的悲剧》由五幕构成。第一幕主要讲浮士德不满足，他严厉批驳包括神学在内的中古四大经院学问。他痴迷巫术， 企图凭借它获得无限知识和至高无上的权力和力量。魔鬼摩菲斯特见他亵渎神并摒弃《圣经》和基督，为取走他的灵魂出现在他的书斋。 浮士德自知他对神的不虔诚已使自己蒙受诅咒， 于是要求魔鬼向其主子撒旦请求再宽限24 年。在第二幕里，浮士德与魔鬼签约。契约生效后，浮士德向摩菲斯特询问有关地狱、惩罚、天文、宇宙及神的问题。第三幕主要讲述浮士德乘龙车考察宇宙构成之后，去到罗马教皇的宫殿里戏弄教皇。 该情节具有新教反对天主教斗争的现实意义。在第四幕中，浮士德展示魔力，为德国皇帝显现亚力山大大帝及其情妇的魂影。 第五幕主要写浮士德对美的追求和他的恐怖死亡场景。
在这部作品里，作者肯定知识是一切力量中最伟大的力量。有了知识就可以获得财富，就能探出“所有外国君主的秘密”，就能“用一道铜墙把德国围起”，“让学生们能穿上绸锻衣服”，一句话，能征服自然，实现社会理想。但是要获得知识首先必须和宗教蒙昧主义进行顽强的斗争。《浮士德博士的悲剧》反映了人文主义者最终未能从宗教中解放出来的历史真实情况。
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