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生信 | 三维基因组技术(五):TAD 分析流程

生信 | 三维基因组技术(五):TAD 分析流程

作者: 生信卷王 | 来源:发表于2021-06-20 14:03 被阅读0次

    写在前面

    以下内容均来自我在菲沙基因(Frasergen)暑期生信培训班上记录的课堂笔记

    1.TAD


    2.TAD分析流程

    git clone https://github.com/blajoie/cworld-dekker.git
    #Change directory to the `cworld-dekker` and install the `Perl` module:
    perl Build.PL
    ./Build
    ./Build install --install_base /your/custom/dir
    (ensure /your/custom/dir is added to your PERL5LIB path)
    
    #e.g.
    ./Build install --install_base ~/perl5
    # then in .bashrc
    export PERL5LIB=${PERL5LIB}:/home/<yourusername>/perl5/lib/perl5
    
    • 2.2 分析所用数据

    互作图谱分染色体matrix数据(单染色的矩阵),如何获得请看:生信 | 三维基因组技术(三):Hi-C 数据比对及HiC-Pro的使用

    matrix数据
    • 2.3 为矩阵添加header

    header文件需要自己准备,操作采用cworld的addMatrixHeaders为矩阵文件添加header

    perl -I /software/cworld-dekker/ \
    /software/cworld-dekker/scripts/perl/addMatrixHeaders.pl \
    -i data/example.matrix \
    --xhf data/headerxchr2 \
    --yhf data/headerychr2
    

    -I:添加cworld的库,连接到cworld软件所在目录即可
    -i:matrix 文件
    --xhf:横坐标表头
    --yhf:纵坐标表头
    自制Header文件,横纵坐标可以相同,和上一次的不同就是,分辨率更小了(10kb),形如:

    • 2.4 TAD边界鉴定
    #export PATH=/local_data1/train/software/R/R-3.5.0/bin/:$PATH
    #export PATH=/local_data1/train/software/bedtools/bedtools2-2.28.0/bin/:$PATH
    perl -I /software/cworld-dekker/ \
    /software/cworld-dekker/scripts/perl/matrix2insulation.pl \
    --is 100000 --ids 40000 \
    -i example.addedHeaders.matrix.gz
    

    -I:cworld-dekker的库
    --is:方框的大小,最好是矩阵分辨率的整倍数(如50kb),好计算

    --ids:window size of insulationd delta,矩阵分辨率的整倍数(如20kb),好计算


    -i:input matrix file,必须是单染色的矩阵,防止划框移动到其他染色体上
    • 结果文件以boundaries结尾

    • 2.5 结果整理
    perl boundaries2bed.pl \
    example.addedHeaders--is100000--nt0--ids40000--ss0--immean.insulation.boundaries \
    17718942 chr6 > example.tad.bed
    
    TAD的范围
    perl脚本

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